La détection d’Espèces Pathogènes Multiples dans la Salive Est associée à une Infection Parodontale chez l’Adulte

RÉSUMÉ

Nous avons étudié si certaines espèces bactériennes et leurs combinaisons dans la salive peuvent être utilisées comme marqueurs de la parodontite. Chez 1 198 sujets, la détection de plusieurs espèces, plutôt que la présence d’un certain agent pathogène, dans la salive était associée à une parodontite déterminée par le nombre de dents avec des poches parodontales approfondies.

La parodontite, infection des tissus qui soutiennent les dents, résulte de l’accumulation de plaque bactérienne pathogène au niveau et en dessous du bord gingival (12). La composition de la communauté de la plaque dentaire joue un rôle central dans l’étiologie de la parodontite (7, 11, 15). Les principaux pathogènes parodontaux sont Aggregatibacter (anciennement Actinobacillus) actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia (anciennement forsythensis), Campylobacter rectus et Treponema denticola (2, 7, 22). Dans la plaque sous-gingivale, P. gingivalis, T. forsythia et T. denticola ont la relation la plus forte avec la destruction des tissus parodontaux (16).

La présence d’agents pathogènes dans les sites sous-gingivaux de parodontites précoces et avancées et dans le parodonte sain a déjà été étudiée (1, 6, 16, 17, 22), alors que les taux de transport naturel des agents pathogènes parodontaux dans la salive sont à peine connus. Récemment, nous avons montré dans une étude basée sur une population d’adultes finlandais que des bactéries parodontales distinctes ont des profils de portage différents en fonction de l’âge, du niveau d’éducation et du statut parodontal des sujets (9). Le transport salivaire des agents pathogènes parodontaux s’est avéré courant: sur les six pathogènes parodontaux examinés, au moins un a été trouvé chez 88% des sujets (9). Étant donné que les principales bactéries parodontales sont couramment trouvées chez les adultes, une combinaison de bactéries pathogènes dans la salive peut représenter un marqueur de la maladie. L’objectif de la présente étude était de déterminer si la salive, un matériau de prélèvement facile et non invasif, peut être utilisée à des fins diagnostiques de la parodontite.

Les sujets de l’étude font partie d’une enquête nationale sur les examens de santé de la population ” Health 2000 Health Examination Survey “, coordonnée par l’Institut national de Santé publique (KTL), Finlande (http://www.ktl.fi/health2000/index.uk.html/). Tous les protocoles ont été approuvés par les comités d’éthique institutionnels. Les méthodes et le recrutement des patients ont déjà été publiés (9). La présente étude comprend des données pour 1 198 sujets dentés, appartenant à l’échantillon du sud de la Finlande (n = 2 616), auprès desquels des données cliniques sur l’examen de santé bucco-dentaire et des données microbiologiques sur les bactéries salivaires étaient disponibles (9).

Le nombre de dents (toutes les dents et les restes de dents) et le nombre de dents parodontalement malades (à l’exclusion des troisièmes molaires) déterminés en ayant des profondeurs de poche de sondage (PPD) de ≥4 mm et ≥6 mm ont été enregistrés par un dentiste spécialement formé. Les antécédents de tabagisme et le niveau d’éducation ont été recueillis au moyen d’entrevues (9). L’ADN bactérien d’échantillons de salive a été extrait (9) et la détection par PCR de six pathogènes parodontaux, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia, C. rectus et T. denticola, a été réalisée en utilisant des amorces spécifiques à l’espèce (3, 13, 20) comme décrit précédemment.

En raison de la distribution biaisée des variables de résultat, un test non paramétrique (analyse de la variance de Kruskal-Wallis) a été utilisé pour analyser les différences des moyennes dans différents nombres d’agents pathogènes. Le risque relatif (RR) et l’intervalle de confiance à 95 % (IC à 95 %) ont été estimés à l’aide de modèles de régression de Poisson. Les variables de résultat comprenaient le nombre de dents présentant des DPP ≥4 mm et ≥6 mm. Le nombre d’espèces, la présence d’agents pathogènes et leurs diverses combinaisons ont été utilisés comme variables indépendantes en plus de l’âge, du sexe, des antécédents de tabagisme et du niveau de scolarité des sujets. Le paquet statistique de SUDAAN a été utilisé dans les analyses pour prendre en compte l’échantillonnage en grappes en deux étapes.

Le tableau 1 présente les caractéristiques de 1 198 sujets de l’étude. Le nombre des six espèces parodontales étudiées dans la salive était associé au nombre de dents présentant des DPP ≥4 mm et ≥6 mm (P< 0,001) (Tableau 2). Chez les femmes qui n’avaient jamais fumé, le nombre plus élevé d’agents pathogènes était associé au nombre plus élevé de dents avec des DPP ≥4 mm (données non présentées). Aucune observation aussi claire n’a été faite auprès des hommes et des femmes qui fumaient quotidiennement. La figure 1 montre les pourcentages de sujets présentant certaines espèces bactériennes ou différentes combinaisons bactériennes. Les associations entre la présence de certains agents pathogènes, seuls ou en combinaison, et le nombre de dents avec des poches approfondies sont présentées dans le tableau 3. Après réglage, le chariot de P. gingivalis, malgré la présence d’autres espèces, était significativement associée à la présence de PPDs ≥6 mm (tableau 3). L’association de combinaisons bactériennes spécifiques (de deux ou trois agents pathogènes) avec des PPD de ≥4 mm (Fig. 2A) était similaire aux résultats avec des PPDs ≥6 mm (Fig. 2B). Plusieurs combinaisons de quatre, cinq et six agents pathogènes étaient significativement associées à l’apparition de poches profondes, mais elles ont été omises parce que le nombre d’espèces bactériennes, plutôt que la présence de certaines espèces, s’est avéré important.

Pour la première fois, dans le présent échantillon de 1 198 adultes finlandais dentés, nous rapportons que le portage salivaire de plusieurs espèces bactériennes parodontales est associé à une parodontite au niveau de la population. La salive est un échantillon diagnostique représentatif pour une vue d’ensemble du microbiote buccal, car des bactéries provenant de divers sites et surfaces de la cavité buccale se trouvent dans la salive et les rinçages buccaux (4, 8, 10, 19, 21). Par exemple, A. actinomycetemcomitans a été détecté dans de la salive non stimulée sans différence statistique avec les échantillons sous-gingivaux regroupés(5). L’échantillonnage par curette sous-gingivale est une méthode reproductible et fiable pour étudier les proportions de bactéries dans les biofilms parodontaux (18). Cependant, cette technique nécessite une personne ayant une formation / une expérience parodontale pour sélectionner des sites sous-gingivaux représentatifs de l’état parodontal, alors que la salive peut être recueillie facilement et avec moins de temps au rendez-vous d’une hygiéniste dentaire ou d’une infirmière. En tant que spécimen facile et non invasif, la salive offre un excellent matériau d’échantillon pour les études à grande échelle sur la santé parodontale ou le transport d’agents pathogènes parodontaux.

La détection de plusieurs espèces pathogènes dans la salive, plutôt que la présence d’un seul agent pathogène dans la salive, a été associée à la parodontite dans notre étude. Bien qu’aucune combinaison spécifique n’ait été significativement plus liée à la maladie que d’autres, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T. forsythia et T. denticola, des espèces qui ont précédemment démontré avoir la relation la plus forte avec la dégradation parodontale (2, 16), ont également joué un rôle majeur dans les combinaisons bactériennes actuelles associées à la maladie. Certaines combinaisons dans la salive étaient associées au nombre de dents avec des poches profondes, mais pas aussi fortement que ce qui a été rapporté pour les échantillons sous-gingivaux (3, 6, 16, 19, 22). Cela peut s’expliquer en partie par l’emplacement géographique; il a été constaté que les profils microbiens sous-gingivaux diffèrent chez les sujets d’Europe et d’Amérique du Nord et du Sud (6). Dans une étude récente utilisant une méthode de PCR multiplex pour détecter la présence sous-gingivale d’A. actinomycetemcomitans, de P. gingivalis et de T. forsythie chez les patients atteints de parodontite, les sujets avec un seul agent pathogène présentaient une maladie plus grave que les sujets avec deux ou trois agents pathogènes, ce qui suggère que les interactions bactériennes positives et négatives sont importantes dans les biofilms parodontaux (14).

Nous avons cherché à savoir si la salive peut être utilisée à des fins diagnostiques de la parodontite. L’échantillonnage salivaire et la technique de PCR permettent une identification rapide des bactéries parodontales. Dans notre population étudiée, cependant, il y avait de nombreuses distinctions entre des sujets d’âges, de sexes et d’habitudes comportementales différents tels que le tabagisme, et aucun marqueur de maladie spécifique n’a pu être établi. Les associations trouvées dans notre étude transversale entre le nombre d’espèces et les poches parodontales étaient cependant fortes, suggérant des marqueurs prédictifs possibles de la parodontite et encourageant d’autres études longitudinales. La présente étude sur une population adulte a indiqué que, plutôt que la présence de certains agents pathogènes parodontaux ou de combinaisons spécifiques, le nombre d’espèces pathogènes dans la salive s’associe à des signes cliniques de parodontite.

iv xmlns:xhtml=”http://www.w3.org/1999/xhtml FIG. 1.

Pourcentage de sujets présentant des agents pathogènes parodontaux ou des combinaisons bactériennes différentes dans la salive dans la population étudiée (n = 1 198). Les espèces bactériennes étudiées sont Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Campylobacter rectus (Cr), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Treponema denticola (Td) et Tannerella forsythia (Tf).

FIG. 2.

RR avec IC à 95% pour la présence de dents avec des PPD ≥4 mm (A) et ≥6 mm (B) dans des combinaisons de deux ou trois agents pathogènes dans la salive (n = 1 198). Des ajustements ont été apportés pour l’âge, le sexe, l’éducation, le nombre de dents et les habitudes tabagiques des sujets. Les espèces bactériennes étudiées sont telles que décrites dans la légende de la Fig. 1.

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TABLEAU 1.

Caractéristiques de base des sujets de l’étude (n = 1 198)

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TABLEAU 2.

Distribution des sujets (n = 1 198) et le nombre moyen de dents avec des poches approfondies par le nombre d’espèces parodontalesc

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TABLEAU 3.

La relation d’occurrence des espèces pathogènes avec des dents à poches parodontales expliquée au moyen de modèles de régression de poisson chez les sujets de l’étude (n= 1 198)

REMERCIEMENTS

Nous remercions l’organisation Health 2000. Tiina Karvonen et Pirjo Nurmi sont reconnus pour leur assistance technique.

Le travail bactérien a reçu le soutien financier de l’Académie de Finlande (subvention 78443 à E.K., subvention 209152 à S.P., et subventions 211129 et 118391 à P.J.P.). L’examen de santé bucco-dentaire a été en partie soutenu par la Société dentaire finlandaise Apollonia et l’Association dentaire finlandaise.

NOTES DE BAS DE PAGE

      i xmlns: hwp=”http://schema.highwire.org/Journal Reçu le 20 septembre 2008.i xmlns: hwp=”http://schema.highwire.org/Journal Retourné pour modification le 1er novembre 2008.i xmlns: hwp=”http://schema.highwire.org/Journal Accepté le 7 novembre 2008.
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RÉSUMÉ Nous avons étudié si certaines espèces bactériennes et leurs combinaisons dans la salive peuvent être utilisées comme marqueurs de la parodontite. Chez 1 198 sujets, la détection de plusieurs espèces, plutôt que la présence d’un certain agent pathogène, dans la salive était associée à une parodontite déterminée par le nombre de dents avec des…

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