Rilevazione di Molteplici Patogeni Specie nella Saliva È Associato con l’Infezione Parodontale negli Adulti

ABSTRACT

Abbiamo studiato se alcune specie batteriche e loro combinazioni nella saliva possono essere utilizzati come marcatori per la parodontite. In 1.198 soggetti, il rilevamento di più specie, piuttosto che la presenza di un determinato agente patogeno, nella saliva è stato associato alla parodontite come determinato dal numero di denti con tasche parodontali approfondite.

La parodontite, infezione dei tessuti che sostengono i denti, deriva dall’accumulo di placca batterica patogena a e sotto il margine gengivale (12). La composizione della comunità della placca dentale svolge un ruolo centrale nell’eziologia della parodontite (7, 11, 15). I principali patogeni parodontali sono Aggregatibacter (precedentemente Actinobacillus) actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia (precedentemente forsythensis), Campylobacter rectus e Treponema denticola (2, 7, 22). Nella placca subgengivale, P. gingivalis, T. forsythia e T. denticola hanno la più forte relazione con la distruzione del tessuto parodontale (16).

La presenza di agenti patogeni nei siti subgengivali di parodontite precoce e avanzata e nel parodonto sano è stata studiata in precedenza (1, 6, 16, 17, 22), mentre i tassi di trasporto naturali dei patogeni parodontali nella saliva sono difficilmente noti. Recentemente, abbiamo dimostrato in uno studio basato sulla popolazione di adulti finlandesi che i batteri parodontali distinti hanno profili di trasporto diversi a seconda dell’età, del livello di istruzione e dello stato parodontale dei soggetti (9). Il trasporto salivare di agenti patogeni parodontali si è rivelato comune: dei sei patogeni parodontali esaminati, almeno uno è stato trovato nell ‘ 88% dei soggetti (9). Poiché i principali batteri parodontali si trovano comunemente negli adulti, una combinazione di batteri patogeni nella saliva può rappresentare un marker per la malattia. L’obiettivo del presente studio era quello di indagare se la saliva, un materiale da collezione facilmente e non invasivo, può essere utilizzato per scopi diagnostici della parodontite.

I soggetti dello studio appartengono a un “Health 2000 Health Examination Survey” nazionale basato sulla popolazione, coordinato dal National Public Health Institute (KTL), Finlandia (http://www.ktl.fi/health2000/index.uk.html/). Tutti i protocolli sono stati approvati dai comitati etici istituzionali. I metodi e il reclutamento dei pazienti sono stati precedentemente pubblicati (9). Il presente studio include dati per 1.198 soggetti dentati, appartenenti al campione della Finlandia meridionale (n = 2.616), dai quali erano disponibili sia dati clinici sull’esame della salute orale che dati microbiologici sui batteri salivari (9).

Il numero di denti (tutti i denti e resti di denti) e il numero di denti parodontalmente malati (esclusi i terzi molari) determinati dalla profondità della tasca di sondaggio (PPDs) ≥4 mm e ≥6 mm sono stati registrati da un dentista appositamente addestrato. La storia del fumo e il livello di istruzione sono stati raccolti da interviste (9). Il DNA batterico da campioni di saliva è stato estratto (9) e il rilevamento PCR per sei patogeni parodontali, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia, C. rectus e T. denticola, è stata eseguita utilizzando primer specie-specifici (3, 13, 20) come descritto in precedenza.

A causa della distribuzione distorta delle variabili di risultato, è stato utilizzato un test non parametrico (analisi della varianza di Kruskal-Wallis) per analizzare le differenze dei mezzi in diversi numeri di agenti patogeni. Il rischio relativo (RR) e l’intervallo di confidenza al 95% (IC al 95%) sono stati stimati utilizzando modelli di regressione di Poisson. Le variabili di risultato includevano il numero di denti con PPDs ≥4 mm e ≥6 mm. Il numero di specie, la presenza di agenti patogeni e le loro varie combinazioni sono state utilizzate come variabili indipendenti oltre all’età, al sesso, alla storia del fumo e al livello di istruzione dei soggetti. Il pacchetto statistico SUDAAN è stato utilizzato nelle analisi per tenere conto del campionamento dei cluster in due fasi.

La Tabella 1 mostra le caratteristiche di 1.198 soggetti dello studio. Il numero delle sei specie parodontali studiate nella saliva è stato associato al numero di denti con PPDs sia ≥4 mm che ≥6 mm (P < 0,001) (Tabella 2). Tra le donne che non avevano mai fumato, il più alto numero di agenti patogeni era associato al più alto numero di denti con PPDs di ≥4 mm (dati non mostrati). Non sono state fatte osservazioni così chiare con uomini e donne che fumavano ogni giorno. La figura 1 mostra percentuali di soggetti con determinate specie batteriche o diverse combinazioni batteriche. Le associazioni tra la presenza di determinati agenti patogeni, da soli o in qualsiasi combinazione, e il numero di denti con tasche approfondite sono mostrate nella tabella 3. Dopo la regolazione, il trasporto di P. gingivalis, nonostante la presenza di altre specie, è stato significativamente associato alla presenza di PPDs di ≥6 mm (Tabella 3). L’associazione di combinazioni batteriche specifiche (di due o tre agenti patogeni) con PPDs di ≥4 mm (Fig. 2A) era simile ai risultati con PPDs ≥6 mm (Fig. 2 TER). Diverse combinazioni di quattro, cinque e sei agenti patogeni sono stati significativamente associati con il verificarsi di tasche approfondite, ma sono stati lasciati fuori perché il numero di specie batteriche, piuttosto che la presenza di alcune specie, si è rivelato importante.

Per la prima volta, nel campione attuale di 1.198 adulti finlandesi dentati, riportiamo che il trasporto salivare di più specie batteriche parodontali è associato alla parodontite a livello di popolazione. La saliva è un campione diagnostico rappresentativo per una visione d’insieme del microbiota orale, poiché i batteri provenienti da vari siti e superfici della cavità orale si trovano nella saliva e nei risciacqui della bocca(4, 8, 10, 19, 21). Ad esempio, A. actinomycetemcomitans è stato rilevato nella saliva non stimolata senza alcuna differenza statistica rispetto ai campioni sottogengivali raggruppati (5). Il campionamento della curetta subgengivale è un metodo riproducibile e affidabile per lo studio delle proporzioni di batteri nei biofilm parodontali (18). Tuttavia, questa tecnica richiede una persona con educazione/esperienza parodontale per la selezione di siti sottogengivali rappresentativi dello stato parodontale, mentre la saliva può essere raccolta facilmente e con meno tempo all’appuntamento di un igienista dentale o di un infermiere. Come campione facile e non invasivo, saliva offre un eccellente materiale campione per grandi studi basati sulla popolazione di salute parodontale o trasporto di agenti patogeni parodontali.

Il rilevamento di più specie patogene nella saliva, piuttosto che la presenza di un singolo agente patogeno nella saliva, è stato associato alla parodontite nel nostro studio. Sebbene nessuna combinazione specifica fosse significativamente più legata alla malattia di altre, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T. forsythia e T. denticola, specie che in precedenza hanno dimostrato di avere la più forte relazione con la rottura parodontale (2, 16), erano anche i principali attori delle attuali combinazioni batteriche associate alla malattia. Alcune combinazioni nella saliva sono state associate al numero di denti con tasche più profonde ma non così fortemente come è stato riportato per i campioni sottogengivali(3, 6, 16, 19, 22). Questo può essere parzialmente spiegato dalla posizione geografica; profili microbici sottogengivali sono stati trovati per differire in soggetti provenienti da Europa e Nord e Sud America (6). In un recente studio utilizzando un metodo PCR multiplex per rilevare la presenza sottogengivale di A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis e T. forsizia nei pazienti con parodontite, i soggetti con un singolo agente patogeno avevano una malattia più grave rispetto ai soggetti con due o tre agenti patogeni, il che suggerisce che le interazioni batteriche sia positive che negative sono importanti nei biofilm parodontali (14).

Abbiamo cercato di scoprire se la saliva può essere utilizzata per scopi diagnostici della parodontite. Il campionamento salivare e la tecnica PCR consentono una rapida identificazione dei batteri parodontali. Nella nostra popolazione di studio, tuttavia, c’erano molte distinzioni tra soggetti di diverse età, sessi e abitudini comportamentali come il fumo e non è stato possibile stabilire alcun marcatore specifico della malattia. Le associazioni trovate nel nostro studio trasversale tra il numero di specie e le tasche parodontali erano forti, tuttavia, suggerendo possibili marcatori predittivi per la parodontite e incoraggiando ulteriori studi longitudinali. Il presente studio in una popolazione adulta ha indicato che, piuttosto che la presenza di determinati patogeni parodontali o combinazioni specifiche, il numero di specie patogene nella saliva si associa a segni clinici di parodontite.

iv xmlns:xhtml=”http://www.w3.org/1999/xhtml FIG. 1.

Percentuale di soggetti con patogeni parodontali o diverse combinazioni batteriche nella saliva nella popolazione in studio (n = 1.198). Le specie batteriche studiate sono Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Campylobacter rectus (Cr), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Treponema denticola (Td) e Tannerella forsythia (Tf).

FIG. 2.

RR con IC al 95% per la presenza di denti con PPDs ≥4 mm (A) e ≥6 mm (B) in combinazioni di due o tre agenti patogeni nella saliva (n = 1.198). Sono stati fatti aggiustamenti per l’età, il sesso, l’istruzione, il numero di denti e le abitudini di fumare dei soggetti. Le specie batteriche studiate sono come descritte nella legenda di Fig. 1.

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TABELLA 1.

Caratteristiche di base dei soggetti dello studio (n = 1.198)

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TABELLA 2.

la Distribuzione dei soggetti (n = 1,198) e il numero medio di denti con approfondita tasche per il numero di parodontali speciesc

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TABELLA 3.

La relazione di presenza di specie patogene con denti con tasche parodontali spiegata mediante modelli di regressione di Poisson in soggetti di studio (n = 1.198)

RICONOSCIMENTI

Ringraziamo l’organizzazione Health 2000. Tiina Karvonen e Pirjo Nurmi sono riconosciuti per l’assistenza tecnica.

Il lavoro batterico ha ricevuto un sostegno finanziario dall’Accademia di Finlandia (grant 78443 a E. K., grant 209152 a S. P. e grant 211129 e 118391 a P. J. P.). L’esame di salute orale è stato in parte supportato dalla Società dentale finlandese Apollonia e dall’Associazione dentale finlandese.

NOTE A PIÈ DI PAGINA

      i xmlns:hwp=”http://schema.highwire.org/Journal Ricevuto il 20 settembre 2008. i xmlns: hwp = “http://schema.highwire.org/Journal Restituito per la modifica 1 novembre 2008.i xmlns:hwp=”http://schema.highwire.org/Journal Accettato 7 novembre 2008.
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ABSTRACT Abbiamo studiato se alcune specie batteriche e loro combinazioni nella saliva possono essere utilizzati come marcatori per la parodontite. In 1.198 soggetti, il rilevamento di più specie, piuttosto che la presenza di un determinato agente patogeno, nella saliva è stato associato alla parodontite come determinato dal numero di denti con tasche parodontali approfondite. La…

ABSTRACT Abbiamo studiato se alcune specie batteriche e loro combinazioni nella saliva possono essere utilizzati come marcatori per la parodontite. In 1.198 soggetti, il rilevamento di più specie, piuttosto che la presenza di un determinato agente patogeno, nella saliva è stato associato alla parodontite come determinato dal numero di denti con tasche parodontali approfondite. La…

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